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haemtech HCAPC-0080說明書

 更新時(shí)間:2018-11-09 點(diǎn)擊量:1460

Haematologic Technologies,Inc。(HTI/haemtech)是一家ISO 9001:2015注冊公司,是一家專業(yè)從事體外研究用高質(zhì)量血漿蛋白分離和表征的主要制造商。HTI的重點(diǎn)是凝血級聯(lián)中涉及的蛋白質(zhì),以及骨代謝的調(diào)節(jié)。HTI產(chǎn)品系列包括超過150種高度純化和充分表征的蛋白質(zhì),包括酶原,酶,輔因子和抑制劑,以及單克隆和多克隆抗體的互補(bǔ)系列。還可提供因子缺乏的等離子體和定制的血液采集管,用于臨床研究。提供的服務(wù)包括定制蛋白質(zhì)純化,蛋白質(zhì)修飾,化驗(yàn)開發(fā),合同制造和合同研究。

 

haemtech Haematologic Technologies,Inc。(HTI/haemtech)是一家ISO 9001:2015注冊公司,是一家專業(yè)從事體外研究用高質(zhì)量血漿蛋白分離和表征的主要制造商。HTI的重點(diǎn)是凝血級聯(lián)中涉及的蛋白質(zhì),以及骨代謝的調(diào)節(jié)。HTI產(chǎn)品系列包括超過150種高度純化和充分表征的蛋白質(zhì),包括酶原,酶,輔因子和抑制劑,以及單克隆和多克隆抗體的互補(bǔ)系列。還可提供因子缺乏的等離子體和定制的血液采集管,用于臨床研究。提供的服務(wù)包括定制蛋白質(zhì)純化,蛋白質(zhì)修飾,化驗(yàn)開發(fā),合同制造和合同研究。

 

haemtech HCAPC-0080說明書

Activated Protein C

活化蛋白C.

 

活化蛋白C(APC)對因子Va的失活
表示APC對因子Va的蛋白水解失活,其中:PS =蛋白質(zhì)S,PCPS =磷脂囊泡(或細(xì)胞表面)和Ca ++ =鈣離子。因子Va對形成因子Vai的失活是由APC(實(shí)心箭頭)在三個(gè)特定位點(diǎn)處的因子Va重鏈(94K)的蛋白水解產(chǎn)生的(1,2)。因子Va重鏈中這些切割位點(diǎn)的位置如下:(人:R306,R506和R679)和(牛:R306,R505和R662)。輔因子分子的*失活需要在精氨酸-306位置切割。通過活化蛋白C在精氨酸-306處的切割僅在膜的存在下發(fā)生,并且需要在精氨酸-505處預(yù)先切割重鏈。APC對因子Va輕鏈的蛋白水解僅發(fā)生在牛分子中,并且不需要滅活(虛線箭頭)。

活化蛋白C(APC)是一種抗凝血絲氨酸蛋白酶,來自兩條鏈,維生素K依賴性酶原,蛋白C(3-7)。α-凝血酶和血栓調(diào)節(jié)蛋白之間的復(fù)合物在蛋白C的重鏈中催化Arg-12(牛中的Arg-14)的單一切割,以產(chǎn)生活化的蛋白C.幾種非生理學(xué)相關(guān)的蛋白酶,例如RVV-X活化劑,胰蛋白酶和PROTAC也能夠激活蛋白C.

APC起到抗凝血?jiǎng)┑淖饔茫浯呋o因子Va和VIIIa的蛋白水解失活,導(dǎo)致凝血酶原酶和因子Xase復(fù)合物的抑制。因子Va和VIIIa的失活是Ca 2+和磷脂依賴性的。維生素K依賴性輔因子蛋白S通過與APC形成1:1復(fù)合物(Kd = 6×10-9M)適度地增加該失活速率(8)。

有幾個(gè)因素會削弱APC的抗凝血活性。因子Xa通過競爭因子Va上的類似結(jié)合位點(diǎn)來保護(hù)因子Va免受APC的蛋白水解。凝血酶也被提議作為APC的調(diào)節(jié)劑通過蛋白質(zhì)S的蛋白水解失活。此外,APC受循環(huán)肝素依賴性蛋白質(zhì)的調(diào)節(jié)。 C抑制劑(PAI-3),循環(huán)肝素非依賴性蛋白C抑制劑,血小板衍生蛋白C抑制劑和PAI-1。據(jù)報(bào)道,在APC和兩種類型的PAI之間形成的復(fù)合物是在輸注APC或體內(nèi)產(chǎn)生APC時(shí)觀察到的纖維蛋白溶解增加的原因。

除了我們的標(biāo)準(zhǔn)APC制劑,還可以獲得含有丹磺酰-EGEG-氯代甲基酮的活性位點(diǎn)封閉形式。

 

 

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HCAPC-0080 人類活性蛋白C

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尺寸

50微克

公式

50%(體積/體積)甘油/ H 2 O.

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存儲

-20℃下

純度

通過SDS-PAGE> 95%

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活動決定

顯色分析

保質(zhì)期(妥善保存)

12個(gè)月

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 HCAPC-DEGR 人類活化蛋白C - DEGR(活性位點(diǎn)受阻)

尺寸

50微克

公式

20mM Tris,150mM NaCl,pH 7.4

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存儲

-80℃下

純度

通過SDS-PAGE> 95%

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活動決定

顯色分析

保質(zhì)期(妥善保存)

12個(gè)月

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 BCAPC-1080 牛活性蛋白C

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尺寸

50微克

公式

50%(體積/體積)甘油/ H 2 O.

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存儲

-20℃下

純度

通過SDS-PAGE> 95%

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活動決定

顯色分析

保質(zhì)期(妥善保存)

12個(gè)月

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 BCAPC-DEGR 牛活性蛋白C - DEGR(活性位點(diǎn)受阻)

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尺寸

50微克

公式

20mM Hepes,150mM NaCl,pH 7.4

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存儲

-80℃下

純度

通過SDS-PAGE> 95%

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活動決定

顯色分析

保質(zhì)期(妥善保存)

12個(gè)月

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通過用凝血酶活化然后通過離子交換層析(4)從純化的蛋白C制備活化的蛋白C. APC以50%(vol / vol)甘油/ H2O供應(yīng),應(yīng)儲存在-20oC。通過SDS-PAGE分析確定純度,并使用顯色底物測定法測量活性。根據(jù)APC耐藥性測定的要求,還測試了所有生產(chǎn)批次的APC延長正常人血漿aPTT的能力(10,11)。每批次提供該測試的結(jié)果,作為aPTT(+/- APC)比率(10nM APC)。

凝膠

Novex 4-12%Bis-Tris

加載

人aPC,每泳道1μg

緩沖

MOPS

標(biāo)準(zhǔn)

SeeBluePlus 2; 肌球蛋白(191 kDa),磷酸化酶B(97 kDa),BSA(64 kDa),谷氨酸脫氫酶(51 kDa),酒精脫氫酶(39 kDa),碳酸酐酶(28 kDa),肌紅蛋白紅(19 kDa),溶菌酶(14 kDa的)

 

本土化

等離子體

行動方式

抗凝血?jiǎng)挂蜃覸a和VIIIa失活

分子量

56,200(人類)(5)
52,650(牛)(5)

消光系數(shù)

Ë

1%

1厘米,280納米

 

= 14.5(人類)(9)

 

 

= 13.7(牛)(9)

 

等電點(diǎn)

4.4-4.8(人類)(9)
4.2-4.5(牛)(9)

結(jié)構(gòu)體

兩條鏈,Mr = 35,000和21,000,二硫鍵連接,NH2-末端gla結(jié)構(gòu)域兩個(gè)EGF結(jié)構(gòu)域

碳水化合物百分比

23%(人類)(5)
14%(牛)(5)

翻譯后修改

十一個(gè)gla殘留物(牛),九個(gè)gla殘基(人),一個(gè)β-羥基天冬氨酸

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