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scarabgenomics CRM197說明書

 更新時間:2018-12-06 點擊量:2595

 

scarabgenomics CRM197說明書

產品

CRM197-1,純化蛋白質,1毫克

CRM197-10,純化蛋白質,10毫克

CRM197-20,純化蛋白質,20毫克

  • 以經濟的價格高純度CRM197 -金龜子的rCRM197是在我們的基因組清潔表達® 大腸桿菌,通過刪除基因組> 20%,可實現完整的超潔凈的蛋白質通過生物工程。由于幾乎所有Scarab的CRM197都完好無損,因此您的半抗原不會浪費。
  • 生物仿制藥天然CRM197 -的氨基酸序列,質譜法,圓二色性,分析所有指示金龜子在我們的基因組清潔制成重組CRM197 ®大腸桿菌相當于CRM197。
  • 共軛準備 - Scarab的CRM197結合能力已通過定量功能測定證實
  • 超低內毒素 - Scarab的工程化清潔基因組® 大腸桿菌具有簡化的內毒素,比標準表達菌株更容易去除。

背景

交叉反應材料197(CRM197)是一種基因無毒形式的白喉毒素(DT)。CRM197中的單堿基變化(位置52處的谷氨酸至甘氨酸)使A鏈的ADP-核糖基化活性失效,減弱毒性1,2。盡管CRM197是無毒的,但它在免疫學上與白喉毒素無法區分。CRM197作為多糖和半抗原的載體起作用,使其在許多結合疫苗中具有免疫原性。

圣甲蟲基因組學CRM197是重組形式的清潔基因表達® 大腸桿菌,我們的專有平臺。

SOURCE
清潔基因組® 大腸桿菌中表達的重組CRM197

產品分子量: 58.4 kDa

數據

 

圖1:Scarab Genomics的CRM197非常純凈,并且在批次之間保持一致。每批Scarab的CRM197的五個重復在Bis-Tris 4-12%梯度SDS聚丙烯酰胺凝膠上運行并用GelCode TM Blue染色,然后通過凝膠掃描評估純度。計算每批的平均純度并如下分配:圖A純度98.3%,圖B純度95.5%。

 

圖2:Scarab Genomics的CRM197純度高于其他商業來源。將來自每種來源的2微克CRM197在Bis-Tris 4-12%梯度SDS聚丙烯酰胺凝膠上電泳并用GelCode TM Blue染色。Scarab產品中幾乎不存在分解產物(表示為A和B帶)。一些泳道中的被涂污的背景是由于蛋白質降解和宿主蛋白質的,兩者在Scarab產品中都是小的。泳道1大小標記,泳道2空泳道3 Scarab Genomics CRM197,SG1泳道4 Scarab Genomics CRM197,SG2,Lane 5供應商F,泳道6供應商M和泳道7供應商L.

 

圖3:Scarab CRM197的LC MS肽圖譜證實它與原生CRM197具有生物學相似性。在Scarab的高純度CRM197上進行氨基酸測序和質譜(MS)。MS材料的廣泛生物信息學分析顯示沒有翻譯后修飾。胰蛋白酶和胰凝乳蛋白酶消化后接著納米液相色譜-MS / MS鑒定出非常高的蛋白質覆蓋率(~97-98%)。Scarab CRM197上的電噴霧電離質譜(ESI-MS)證實了預期的肽序列。沒有觀察到與報道的氨基酸組成和側鏈修飾的差異。

 

圖4:圣甲蟲的CRM197結合有效。并非CRM197中的所有賴氨酸都暴露在蛋白質表面上以進行潛在的綴合。采用Solulink的ChromaLink™生物素結合測定(San Diego,CA),利用NHS酯反應方案將生物素與伯胺結合,我們證實Scarab的CRM197上至少有10個位點可用于結合。這種光學定量(在354nm處的吸光度)功能測試證實,Scarab的CRM197上的賴氨酸可與半抗原結合,如天然CRM197。

產品規格

質量控制

純度:

通過SDS-PAGE檢測≥95%CRM197

A鏈和B鏈含量≤總CRM197的5%

濃度:

在150mM NaCl,25mM HEPES,pH7.4中4mg / mL,通過280nm處的吸光度,使用E0.1%= 1.07對1mg / mL溶液

內毒素:

通過動態濁度LAL法≤25EU/ mg蛋白質(大靈敏度= 0.01 EU / mL)

二聚體:

≤5%

等級: CRM197僅供研究使用,不適用于人類或診斷代理。

儲藏條件:

  • CRM197是0.2μm過濾的4mg / mL CRM197,150mM NaCl,25mM HEPES,pH7.4的冷凍溶液。收到后儲存在-70°C。
  • 為了使聚集小化,將CRM197在37°C水浴中解凍1小時。
  • 重復的凍融循環會降解材料。為了大限度地減少凍融循環,將CRM197等分以匹配所需的用途。
  • 輕輕處理產品,不要VORTEX

 

 

 

 

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