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ArcticZymes 71800-100說明書

 更新時間:2019-10-16 點擊量:1341

ArcticZymes將利用其在北極海洋中的生物勘探活動,成為分子研究和診斷新型冷適應酶商業化的。

ArcticZymes 71800-100說明書

T4 DNA連接酶

數量產品信息貨號價錢

T4 DNA連接酶包裝大小:250 kU數量

包裝尺寸:250 kU濃度:5000 U / µl#71800-20225 歐元
不適用包裝尺寸:根據協議濃度:根據協議#71800-100詢價

 

  • 描述

T4 DNA連接酶是一種依賴ATP和Mg 2+的 dsDNA連接酶,可催化雙鏈DNA,雙鏈RNA和某些DNA / RNA中3'-羥基和5'-磷酸末端之間的磷酸二酯鍵的形成。T4 DNA連接酶在平末端和內聚末端底物上均具有活性。

 

 

T4 DNA連接酶

 

總覽

T4 DNA連接酶是一種依賴ATP和Mg 2+的 dsDNA連接酶,可催化雙鏈DNA,雙鏈RNA和某些DNA / RNA中3'-羥基和5'-磷酸末端之間的磷酸二酯鍵的形成。T4 DNA連接酶在平末端和內聚末端底物上均具有活性。

這是T4 DNA連接酶的高質量(商業級)版本。T4 DNA連接酶在大腸桿菌中重組產生。ArcticZymes的T4 DNA連接酶經過了廣泛的測試,能夠污染DNase和RNase活性以及殘留的宿主細胞gDNA。

T4 DNA Ligas中的大腸桿菌 gDNA 污染
商業T4 DNA Ligas中的殘留大腸桿菌gDNA
圖1:T4 DNA Ligases通常含有大腸桿菌 gDNA。分析了ArcticZymes的T4 DNA連接酶和四種市售的T4 DNA連接酶(5000個單位)是否污染了大腸桿菌 gDNA。在兩個商業連接酶中檢測到了大腸桿菌 gDNA。使用基于探針的qPCR分析,一式三份進行分析。

性質

單位定義:  一個單位的定義是在總反應體積為5%的情況下,對λDNA的2322和2927 bp HindIII片段進行75%連接(5´DNA末端濃度為0.12 µM,300 µg / ml)所需的酶量。在16°C下30分鐘內于50 mM Tris-HCl(pH 7.5),10 mM MgCl 2、1 mM ATP和10 mM DTT中20μl。

一個Weiss單位約等于500 ArcticZymes單位。

滅活:通過在70°C下孵育10分鐘,可以*滅活T4 DNA連接酶。

儲存和穩定性

該酶在提供的存儲緩沖液中在-20°C穩定1年以上。

該酶可耐受至少四個凍融循環(-80°C)而不會喪失活性。

質量控制

ArcticZymes致力于提高產品質量。T4 DNA連接酶是在挪威的ISO 13485認證工廠生產的。

dsDNA核酸內切酶活性

將10,000 U T4 DNA連接酶與超螺旋質粒(1 µg)在37°C下孵育4小時。瓊脂糖凝膠電泳未顯示出封閉的環狀DNA向有切口的DNA的任何轉化。

ssDNA核酸內切酶活性

將10,000 U T4 DNA連接酶與M13 ssDNA(0.5 µg)在37°C下孵育4小時。瓊脂糖凝膠電泳未顯示任何可見的ssDNA降解跡象。

核酸外切酶活性

將10,000 U T4 DNA連接酶與3 H-dATP標記的ds或ssDNA(0.5 µg,500 bp)在37°C 下孵育4小時。對于任何一種底物,標記DNA的酸溶放射性均未超過空白測試。

RNase活性

將5000 U T4 DNA連接酶與2 kb RNA轉錄物(0.5 µg)在37°C下孵育4小時。瓊脂糖凝膠電泳未發現任何可見的RNA降解跡象。

大腸桿菌 gDNA污染

在基于探針的qPCR分析中分析了5000 U T4 DNA連接酶,檢測了大腸桿菌中的23S核糖體亞基。無大腸桿菌的gDNA可以檢測(LOD:<3 大腸桿菌基因組拷貝)。

 

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