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swant 300說明書

 更新時間:2019-11-15 點擊量:1403

swant 300說明書

 

產品名稱鈣結合蛋白D28K小鼠單克隆抗

英文名稱Monoclonal anti Calbindin D-28k

貨號: 300

批號07 (F)

外觀:凍干粉.

      溶解200 µl / 500 µl  1 ml 雙蒸水

規格:

貨號

規格

swant-300-200µl

200ul

swant-300-500µl

500ul

swant-300-1ml

1ml

 

產品描述:

鈣結合蛋白 D-28k單克隆抗體是將小鼠骨髓瘤細胞與來自腸道[1]的鈣結合蛋白-28k免疫小鼠脾細胞雜交產生的小鼠IgG1。鈣結合蛋白D-28k的單克隆抗體(McAB),是EF-hand家族與鈣調素和肌鈣蛋白C相關的鈣結合蛋白。

 

反應種屬:

WB:人、猴、豚鼠、兔、大鼠、小鼠和雞。

經WB免疫印跡驗證McAB 300(鈣結合蛋白 D-28k)能測除魚以為的人、猴、豚鼠、兔、大鼠、小鼠和雞的組織提取物(見圖1)。并且不與鈣網膜蛋白及其他鈣結合蛋白產生交叉反應。凝膠電泳顯示McAB 300(鈣結合蛋白 D-28k)特異性結合位點為D-28k(MW 28'000,IEP 4.8)。放射免疫法檢測鈣結合蛋白D-28k,靈敏度為10ng/反應,親和力為1.6x 1012 L/M。

 

經測試應用:

WB, IHC-P/Fc, IF-P/FcELISARIA

WB 免疫印跡; IHC :免疫組織化學;IF:免疫熒光,ELISA:酶聯免疫;RIA:放射免疫

以下方法廠家已用于驗證抗體的特異性和效價評價:(a)免疫組化/免疫熒光(HRP或生物素-親和素標記法檢測4%多聚甲醛固定的冰凍組織切片/石蠟組織切片;(b)免疫印跡WB/ELISA;(c)放射免疫分析。

 

 

 

 

稀釋比例

免疫組化: 1:5'000 - 1:10'000 生物素標記法。

WB 1:100 - 1:1'000 HRP)。

建議根據實驗內容選擇合適的方法。

.

儲存:

短期保存:- 20°C,長期保存:- 80°C,近期頻繁使用保存于 4°C (增加0.01% 疊氮鈉)。避免反復凍融。建議分裝小份儲存。

 

特異性表達:

免疫組織化學染色表明鈣結合蛋白 D-28k特異表達在所有脊椎動物(魚類除外)的腦、腎和胰腺的組織切片(漂片/貼片法)

 

腦組織提取物WB 檢測

 

1 2 3 4 5 6 7

 

28 Kda

 

1 :不同種屬腦組織勻漿液的WB檢測結果。上樣順序依次為:1 小鼠;2 大鼠;3 豚鼠;4 兔子;5 食蟹猴;6 斑馬魚;7 重組鈣結合蛋白D-28kWB結果表明,在所有物種中(斑馬魚除外),僅特異檢測到28kDa的條帶。

 

鈣結合蛋白D-28k基因敲除小鼠的免疫組織化學(IHC)研究

CB300鈣結合蛋白 D-28k)于正常腦組織的神經元高表達(圖2a)而在鈣結合蛋白D-28k基因敲除小鼠腦組織的相同區域未見陽性表達(圖2b)。

 

 

 

 

 

 

DG

 

 

 

 

 

 

 

Py

 

 

 

DG

 

 

 

 

 

 

 

 

 

Py

 

2a: McAB300的免疫組織化學染色 正常小鼠腦組織海馬齒狀回(DG)區及錐體細胞中可見強陽性表達。100 X鏡下。

 

Fig 2b: McAB 300 免疫組化染色鈣結合蛋白D-28k基因敲除小鼠,與對照組相比,相同腦海馬區未見陽性表達。血管部位可見由小鼠二抗產生的非特異性表達。DG: 齒狀回, Py:錐形細胞 100 X鏡下

 

參考文獻

  1. Celio M.R. et al., Cell Calcium 11:599-602, 1990
  2. Kretsinger R.H. (1981) Neurosci. Res. Progr. Bull. 19/8, MIT-Press
  3. Garcia-Segura L.M. et al. (1984) Brain Rews. 296: 75-86.
  4.  Airaksinen M.S., et al, (1997), PNAS 94(4) : 1488-1493
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