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qa-bio E-S001說明書

 更新時間:2020-01-21 點擊量:2132

 

 

qa-bio E-S001說明書

外糖苷酶

-從聚糖上切割特定的末端單糖- 
允許對聚糖結構進行詳細分析
-測試所有酶是否沒有蛋白水解或意外的糖苷活性

唾液酸酶au圖像

唾液酸酶金

來自脲曲霉的重組

部件號-酶量
E-S001-60 µLs¹ 
E-S001-20-20 µLs¹ 
E-S001-200-200 µls²¹ 
   含緩沖液
   ² 僅含酶

神經氨酸酶,NANase,N-乙酰神經氨酸糖水解酶,Exo-α-唾液酸酶

α(2-3,6,8,9)唾液酸酶Au切割所有復雜的碳水化合物和糖蛋白上的非還原性末端唾液酸殘基。不同鍵的相對裂解率是:
α(2-6)>α(2-3)>α(2-8),α(2-9)。

另外,該酶將裂解分支的唾液酸(連接至內部殘基)。該特性使其在唾液酸酶中具有*性。裂解分支殘基可能需要高濃度的酶和延長的孵育時間。要僅切割非還原性末端α(2-3)未分支的唾液酸殘基,請使用Sialidase SP(部件號E-S007)

α-(2-3,6,8,9)唾液酸酶是從脲節(jié)桿菌的克隆中分離出來的。使用寡糖標準品已對該酶進行了廣泛表征。

重組細菌脲桿菌中的大腸桿菌

EC 3.2.1.18


20 mM Tris-HCl,25 mM NaCl,pH 7.5中的唾液酸酶含量

包括20 µL和60 µL的包裝尺寸:
5x反應緩沖液250 mM磷酸鈉,pH 6.0

比活度 > 135 U / mg 
活度 > 5 U / ml

分子量 70,000道爾頓

pH范圍 4.5-7,6.0 
推薦的緩沖液濃縮物為標準底物的酶活性提供了pH。如果由于糖蛋白溶解度或活性要求而在次pH值下進行糖苷酶處理,則預期酶活性會有所降低。

建議用法
1.向試管中加入多100μg糖蛋白或1 nmol寡糖。
2.加水至14μL。3 
.添加4μL5X反應緩沖液。
4.加入2μLα(2-3、6、8、9)唾液酸酶。
5.在37°C下孵育1小時。

如果天然和脫唾液酸化蛋白之間的大小差異足以檢測,則可以通過SDS-PAGE監(jiān)測脫唾液酸化作用。

注意:如果存在分支唾液酸,則需要更長的孵育時間。

特異性消除所有非還原性末端支鏈和直鏈唾液酸

比活性定義為在37℃,pH 5.0下從MU-NANA [2'-(4-甲基傘形酮)-α-DN-乙酰基神經氨酸]生產1 µmol甲基傘形酮所需的酶量。

儲存將儲存在4℃。

純度如下測試每批α(2-3,6,8,9)唾液酸酶是否污染了蛋白酶。將10μg變性的BSA與2μL酶孵育24小時。經處理的BSA的SDS-PAGE分析未顯示降解跡象。
生產宿主菌株已經過廣泛測試,不會產生任何可檢測的糖苷酶。

穩(wěn)定性正確存放后至少可穩(wěn)定12個月。幾天暴露于環(huán)境溫度不會降低活性。酶在37°C下保持活躍至少一周。

 

 

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