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microgembio核酸提取試劑盒

 更新時間:2020-03-27 點擊量:1841

microgembio核酸提取試劑盒

 

RNA GEM是一種完整的核酸提取試劑盒,提供了一種非常簡單的方法來從單個細(xì)胞提取RNAGEM可以從中提取許多細(xì)胞類型的插圖。100,000個細(xì)胞的RNA 。該套件包含無RNase的酶,緩沖液和DNase I,非常適合處理:

 

  • 哺乳動物細(xì)胞培養(yǎng)
  • 激光捕獲顯微切割(LCM)

 

 

  • 熒光激活細(xì)胞分選(FACS)準(zhǔn)備的細(xì)胞群

 

核糖核酸

 

從哺乳動物細(xì)胞培養(yǎng),激光捕獲顯微切割和FACS準(zhǔn)備的細(xì)胞群體(例如巨噬細(xì)胞)中提取RNA

適用于RT-PCR和RT-qPCR

每個試劑盒均包含RNAGEM,DNase I,BLUE緩沖液,10x DNase緩沖液和10x TE

反應(yīng)數(shù)產(chǎn)品代碼價錢
50RTP0050$ 147.00
100RTP0100$ 280.00
500RTP0500$ 1,330.00
1000RTP1000$ 2,520.00

該圖顯示了100、500和1,000個反應(yīng)試劑

 

RNA GEM是一種完整的核酸提取試劑盒,提供了一種非常簡單的方法來從單個細(xì)胞提取100,000個細(xì)胞的RNA。該試劑盒包含無RNase的酶,緩沖液和DNaseI。它能夠從哺乳動物細(xì)胞培養(yǎng)物,激光捕獲顯微切割和FACS制備的細(xì)胞群(例如巨噬細(xì)胞)中進(jìn)行溫度控制的快速制備RNA。

  • 簡化的手動工作流程可在5分鐘內(nèi)提供RT-PCR和RT-qPCR就緒的RNA
  • 在廣泛的細(xì)胞數(shù)量內(nèi)以優(yōu)異的線性釋放RNA和DNA
  • 無需進(jìn)一步純化RNA即可進(jìn)行準(zhǔn)確的RT-PCR和RT-qPCR分析
  • 不含抑制劑意味著無需進(jìn)行苛刻的化學(xué)清洗或多個步驟
  • 減少的處理可保護(hù)樣品的完整性

 

RNA提取工作流程

*,由于RNA分子的低穩(wěn)定性和大量的RNase,RNA的提取是一個困難的過程。MicroGEM的RNAGEM通過極快的溫度控制的RNA提取解決了這一問題,該提取可同時裂解細(xì)胞并消除RNase。RNAGEM試劑盒高度適應(yīng)各種提取體積,并可以根據(jù)細(xì)胞數(shù)量進(jìn)行縮放。提取后,包括可選的DNase處理以富集RNA。RNA立即可用于下游應(yīng)用,例如RT-PCR和RT-qPCR。可以將這些試劑直接添加到RNA樣品中,以進(jìn)行簡單的流線型96孔板操作。

RNAGEM經(jīng)過優(yōu)化,可與多種不同的培養(yǎng)類型一起使用,包括懸浮細(xì)胞,貼壁細(xì)胞,RNAlater™中存儲的細(xì)胞,細(xì)胞沉淀以及FACS和LCM。

提取工作流程

所述RNA GEM試劑盒允許總核酸提取或根據(jù)需要的RNA的提取只是。共純化RNA和DNA的方案非常快捷,只需5分鐘即可從樣品變?yōu)楹怂帷为毜腞NA可以通過添加DNase(試劑盒提供)進(jìn)行純化,這又會增加10分鐘的操作時間。該圖總結(jié)了共純化和RNA提取工作流程。

RNA GEM與聚合酶和逆轉(zhuǎn)錄酶兼容,提取物無需純化即可用于PCR,RT-PCR,qPCR和RT-qPCR。這導(dǎo)致在廣泛的細(xì)胞數(shù)目范圍內(nèi)更高的靈敏度和線性度。

將HeLa細(xì)胞中的5 µl RNA GEM提取物直接添加到RT-qPCR中后,獲得此處的圖  。RNA GEM提取的細(xì)胞數(shù)量為10 – 50,000,  并從高豐度mRNA(ACTB;ß-actin)和低豐度mRNA(BRCA1;乳腺癌早期發(fā)作)生成圖。梯度類似于標(biāo)準(zhǔn)品的干凈痕跡表明沒有抑制作用,從少至10個細(xì)胞中獲得的圖表明了該方法的靈敏度。

從一系列10-50,000個細(xì)胞的HeLa細(xì)胞稀釋液中提取的RNA的RT-qPCR圖。A:高拷貝數(shù)mRNA(ACTB)B:低拷貝數(shù)mRNA(BRCA1)。紅色=標(biāo)準(zhǔn);藍(lán)色=重復(fù)的mRNA曲線。

使用推薦的方法,RNA GEM提取的效率在  1到大約100,000個細(xì)胞的范圍內(nèi)是恒定的,并具有出色的產(chǎn)量(請參閱下文)。相反,TRIzol®提取會損失低豐度細(xì)胞的mRNA。這意味著可以通過簡單的非DNase處理的提取物中g(shù)DNA的qPCR獲得樣品歸一化。

 

 

 

 

 

 

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