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qa-bio E-EF01-20說明書

 更新時(shí)間:2021-05-20 點(diǎn)擊量:1195

qa-bio E-EF01-20說明書

 

E-EF01-20

 

從肽和蛋白質(zhì)中選擇性釋放雙觸角聚糖

查看產(chǎn)品文檔:
Specsheet   CoA   SDS

部件號(hào)–酶量
E-EF02 – 60 µLs¹ 
E-EF02-20 – 20 µls¹ 
E-EF02-200 – 200 µls²¹
含緩沖液
²僅含酶

產(chǎn)品描述

內(nèi)切F2,內(nèi)切糖苷酶F2,內(nèi)切β-N-乙酰氨基葡糖苷酶F2

Endo F2從糖蛋白上裂解N聯(lián)(天冬酰胺連接)雙觸角寡糖。它還可以切割高甘露糖聚糖,但切割速率降低40倍。其在寡糖的二乙酰基殼二糖核心中的兩個(gè)N-乙酰氨基葡糖殘基之間裂解,產(chǎn)生截短的糖分子,其中一個(gè)N-乙酰氨基葡糖殘基保留在天冬酰胺上。相反,PNGase F可以完整清除寡糖。

內(nèi)切糖苷酶F2對(duì)蛋白質(zhì)構(gòu)象的敏感性低于PNGase F,因此更適合天然蛋白質(zhì)的去糖基化。但是,為獲得最佳結(jié)果,建議糖蛋白變性。

附加遠(yuǎn)藤?F產(chǎn)品
內(nèi)切糖苷酶F1釋放bianatennary和一些混合聚糖
內(nèi)切糖苷酶F3將釋放triantennarry和巖藻糖基雙觸角N-聚糖
的遠(yuǎn)藤?F多套件包括每個(gè)遠(yuǎn)藤?F酶及其緩沖器的20個(gè)μLs。

源重組Elizabethkingia miricola(是腦膜膿毒性金黃)在大腸桿菌

EC 3.2.1.96

特異性
從肽和蛋白質(zhì)中裂解所有天冬酰胺連接的雙觸角寡糖和高甘露糖(盡管降低了40倍)

內(nèi)容
60的酶微升等分試樣(0.3 U)在10mM乙酸鈉的25mM NaCl,pH為4.5

包括20 µL和60 µL的包裝尺寸:
5x反應(yīng)緩沖液– 250 mM乙酸鈉,pH 4.5

比活度> 20 U / mg
活度> 5 U / ml

分子量32,000道爾頓

建議用法
1.在Eppendorf管中加入200 µg糖蛋白。用去離子水將最終體積調(diào)整為38 µl。
2.添加10 µl 5x反應(yīng)緩沖液4.5。3 
.添加2.0 µl Endo F2。在37°C下孵育1小時(shí)。

比活性
定義為在37°C,pH 5.5下1分鐘內(nèi)催化1微摩爾變性豬纖維蛋白原釋放N-連接寡糖所需的酶量。通過SDS-PAGE監(jiān)測(cè)裂解(裂解的纖維蛋白原遷移更快)。

儲(chǔ)存將酶保存在4?C下??。

穩(wěn)定性正確存放后至少可穩(wěn)定12個(gè)月。幾天暴露于環(huán)境溫度不會(huì)降低活性。

純度如下測(cè)試內(nèi)切糖苷酶F2對(duì)蛋白酶的污染。將10μg變性的BSA與2μL酶在37oC下孵育24小時(shí)。經(jīng)處理的BSA的SDS-PAGE分析未顯示降解跡象。

生產(chǎn)宿主菌株已經(jīng)過廣泛測(cè)試,不會(huì)產(chǎn)生任何可檢測(cè)的糖苷酶。

 

 
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