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ibidi I型膠原蛋白說明書

 更新時間:2021-08-11 點擊量:2092



ibidi 生產和分銷少量經過*質量控制的試劑。這些試劑是專門針對特定應用開發和測試的。在這里找到 LifeAct 肌動蛋白可視化產品、細胞培養和顯微鏡試劑,以及各種細胞和檢測服務。

ibidi I型膠原蛋白說明書


I型膠原蛋白,鼠尾

    I型膠原蛋白,鼠尾

    用于細胞培養應用(例如,3D 凝膠、支架和涂層)的高質量鼠尾 I 型膠原蛋白溶液

    • 提供體內樣細胞外基質 (ECM) 結構

    • 用于模擬凝膠基質中生物 ECM 的非胃蛋白酶化的天然膠原蛋白

    • 快速聚合促進 3D 凝膠中的最佳細胞分布

    50201


    應用:

    • 體內樣基質中的3D 細胞培養

    • 3D 環境中的活細胞成像

    • 為類器官和球體創建 3D 支架

    • 使用µ-Slide Chemotaxis進行 3D 膠原凝膠的趨化分析

    • 懸浮細胞(如白細胞)的細胞遷移分析

    • 用薄膠原層涂覆細胞培養容器以促進細胞附著

    • 2D 與 3D 環境中的細胞分化研究

    • 由于自發熒光低,非常適合熒光顯微鏡

    技術特點:

    • 來自大鼠肌腱的高質量純化蛋白

    • 高度標準化的制造過程,嚴格的質量控制

    • 溫和的制造工藝,實現高水平的誕生

    • 提供了詳細的協議以方便處理

    • 冷藏包裝運輸并在 –20°C 下儲存,以獲得明確的質量和重現性

    • 有 2 種濃度可供選擇:用于標準應用的 5 mg/ml 和用于特殊應用的 10 mg/ml 的高濃度溶液

    • 市場上高水平的天然交聯(最高質量等級)

    • 高粘度:建議使用用于高粘度溶液的專用移液器

    • 低自發熒光

    規格:

    源材料鼠尾肌腱
    外貌光學透明粘稠液體
    萃取酸,非胃蛋白酶
    純度> 90% SDS PAGE
    無菌無菌,用于細胞培養
    質量檢測并發現 DNA、細菌、真菌和支原體呈陰性
    生長因子沒有任何
    公式以 17.5 mM 乙酸 (0.1%) 提供
    酸堿度3.8
    功能控制細胞培養中的 3D 凝膠和 2D 涂層測試
    貯存–20°C,避免多次凍融循環


    注意:我們推薦 5 mg/ml 膠原蛋白溶液用于 3D 凝膠和培養器皿的薄涂層。由于其高濃度(和高粘度),10 mg/ml 膠原蛋白溶液更適用于特殊應用,例如支架和生物打印。

    使用膠原蛋白作為體內樣基質進行 3D 細胞培養

    膠原蛋白是結締組織的主要成分,在哺乳動物體內含量豐富。它廣泛用于 3D 細胞培養以模擬生物細胞外基質,或作為促進細胞附著的涂層。

    許多細胞在三維環境中自然生長。在體外培養時,細胞附著在平坦的 2D 表面上,其行為可能與在 3D 凝膠基質內時不同。在許多情況下,3D 環境更類似于體內情況,在規劃細胞培養檢測時應考慮到這一點。

    貼壁 HT-1080 癌細胞的顯微鏡檢查

    貼壁HT-1080癌細胞示意圖

    貼壁 HT-1080 癌細胞在 2D 表面(左)并嵌入 3D I 型膠原蛋白、大鼠尾基質(右)的顯微鏡和示意圖。

    膠原蛋白結構

    膠原蛋白是一種纖維蛋白,由三個 α 鏈組成。它們結合形成繩狀三螺旋,從而為細胞外基質 (ECM) 提供拉伸強度。α 鏈包含 GXY 重復序列,其中包括甘氨酸 (G),這是一種非常適合三螺旋的氨基酸。通常,X 和 Y 代表羥脯氨酸和脯氨酸,它們是膠原蛋白穩定性的關鍵成分。三重螺旋以自組織方式聚集并形成原纖維。在體內,原纖維聚合成纖維,形成肌腱或真皮等組織。

    用于體外實驗的膠原蛋白是從動物組織中提取的酸或酶。在酸性條件下(低 pH 值),纖維分解成可溶性原纖維。在一些提取方法中,胃蛋白酶用于促進膠原蛋白的提取。但胃蛋白酶也會在一定程度上消化膠原蛋白,導致天然纖維交聯活性顯著降低。

    與胃蛋白酶提取的膠原蛋白(通常來自牛皮膚)不同,ibidi I 型鼠尾膠原蛋白是酸提取的。這一點,以及非常溫和的制造過程,保留了最大的誕生。

    膠原蛋白的結構

    膠原蛋白的結構

    膠原聚合

    在酸性溶液中,膠原纖維以無定向的方式存在。膠原纖維之間僅形成氫鍵,這使溶液具有高粘度。變為中性 pH 值會導致原纖維聚合成纖維。這種聚合產生了一種三維膠原凝膠。所用膠原蛋白的原生水平決定了膠原蛋白網絡中的纖維交聯水平。天然(非胃蛋白酶提取的)膠原蛋白表現出高水平的交聯,而胃蛋白酶化的膠原蛋白溶液在體內形成較少的凝膠。

    膠原聚合


    ibidi 膠原蛋白 I 型,鼠尾膠原蛋白由于蛋白質濃度高而具有非常高的粘度,尤其是在 10 毫克/毫升時。pH 驅動聚合改變其特性如下:


    非聚合膠原蛋白聚合膠原蛋白
    宏觀光學外觀透明至微乳白色白色,混濁
    顯微光學外觀清晰,無結構纖維網絡,構建在顯微鏡下可見的纖維
    粘度很高,但仍在流動不流動;小的變形(例如,通過移液器吸頭)會使結構破裂
    移液可使用特殊移液器移
    取高粘度液體
    無法定義移液,任何機械力都會破壞結構和機械性能





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