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jembio Klenow 片段,DNA 聚合酶簡介

 更新時間:2022-05-19 點擊量:1103



jembio Klenow 片段,DNA 聚合酶簡介

Klenow Fragment


Klenow ,大腸桿菌 DNA 聚合酶 l 酶的大片段,保留聚合酶 l 的聚合酶和校對 3'->5' 外切核酸酶活性。
描述:缺乏 5'-核酸外切酶活性 (1)。超純重組酶。用于 Sanger 雙脫氧測序 (2)。適用于第二鏈 cDNA 合成 (3)。用于 3'-末端標記和填充 5'-突出粘性末端 (4)。
單位定義:一個單位是在 37oC 下 30 分鐘內將 10 nmoles 的總核苷酸摻入酸不溶形式所需的酶量。
儲存條件:儲存在 –20oC。
儲存緩沖液:50 mM 磷酸鉀 (pH 7.0)、0.25 mM 二硫蘇糖醇和 50% (v/v) 甘油。
測定條件:67 mM 磷酸鉀 (pH 7.4)、6.7 mM MgCl2、1 mM 二硫蘇糖醇、dCTP、dGTP、dTTP 和 [a-32P]dATP 各 0.033 mM,以及 4.5 µg 活化 DNA。在 100 µl 反應體積中,在 37oC 下孵育 30 分鐘。
質量控制:對所有制劑進行污染核酸內切酶和 5'-核酸外切酶活性檢測。通過 SDS 聚丙烯酰胺凝膠電泳判斷,典型的制劑純度大于 95%。

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