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abbexa abx257694說明書

 更新時間:2022-06-24 點擊量:733


abbexa abx257694說明書


人 Asprosin ELISA 試劑盒


Human Asprosin ELISA Kit 是一種 ELISA 試劑盒,用于體外定量測量血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿、細胞裂解物和其他生物體液中的 Human Asprosin 濃度。低水平的白脂素可用于指示馬凡脂肪營養(yǎng)不良綜合征,高濃度的白脂素可見于肥胖患者。

介紹Asprosin 是哺乳動物在其脂肪(白色脂肪)組織中產(chǎn)生的一種蛋白質(zhì)激素,可刺激肝臟將葡萄糖釋放到血液中。在這些組織中,白脂蛋白由 FBN1 基因編碼,該基因也編碼蛋白原纖維蛋白。在肝臟中,白脂素通過環(huán)磷酸腺苷 (cAMP) 依賴性途徑激活快速葡萄糖釋放。貝勒醫(yī)學(xué)院的 Atul Chopra 博士及其同事首先將 Asprosin 鑒定為 FBN1 基因產(chǎn)物原纖維蛋白的 C 末端切割產(chǎn)物。他們在兩名患有先天性部分脂肪營養(yǎng)不良和早老樣外觀的患者中發(fā)現(xiàn)了 FBN1 基因突變。這兩名患者是莉齊·維拉斯克斯和艾比·所羅門。這些患者中 FBN1 蛋白的截斷被認為對蛋白質(zhì)產(chǎn)生有兩個影響:一種突變/截短的原纖維蛋白和非常低的血漿白脂素水平(來自假定的顯性負效應(yīng))。這種情況后來被命名為 Marfanoid-progeroid-lipodystrophy 綜合征。
目標白脂素
反應(yīng)性人類
測試應(yīng)用酶聯(lián)免疫吸附試驗
推薦稀釋最佳稀釋度/濃度應(yīng)由最終用戶確定。
貯存在 4 °C 下運輸。收到后,按照套件手冊中的存放說明存放套件。
有效性該套件的有效期為 6 個月。
穩(wěn)定試劑盒的穩(wěn)定性取決于活性損失率。在適當?shù)膬Υ鏃l件下,保質(zhì)期內(nèi)損失率小于5%。為了盡量減少性能波動,應(yīng)嚴格控制操作程序和實驗室條件。還強烈建議整個測定由同一用戶自始至終執(zhí)行。
基因符號FBN1
測試范圍0.156 納克/毫升 - 10 納克/毫升
靈敏度< 0.06 納克/毫升
標準格式凍干
檢測方法比色法
檢測類型三明治
檢測數(shù)據(jù)定量的
樣品類型血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿、細胞裂解物和其他生物液體。
目標類型抗原
測定原理該試劑盒基于夾心酶聯(lián)免疫吸附測定技術(shù)。將抗體預(yù)涂在 96 孔板上。將標準品、測試樣品和生物素結(jié)合試劑添加到孔中并孵育。然后加入 HRP 偶聯(lián)試劑,并孵育整個板。在每個階段使用洗滌緩沖液去除未結(jié)合的結(jié)合物。TMB 底物用于量化 HRP 酶促反應(yīng)。加入 TMB 底物后,只有含有足夠 FBN1 的孔才會產(chǎn)生藍色產(chǎn)物,加入酸性終止液后變?yōu)辄S色。黃色的強度與板上的 FBN1 量成正比。光密度 (OD) 在酶標儀中以 450 nm 分光光度計測量,從中可以計算 FBN1 的濃度。
套件組件列出的套件組件僅供參考。產(chǎn)品手冊可能略有不同。產(chǎn)品應(yīng)按照隨附的產(chǎn)品手冊中的說明使用,并與產(chǎn)品一起交付。
  • 預(yù)涂層 96 孔微孔板

  • 標準

  • 標準稀釋緩沖液

  • 洗滌緩沖液

  • 檢測試劑A

  • 檢測試劑B

  • 稀釋劑 A

  • 稀釋劑 B

  • TMB基板

  • 停止解決方案

  • 封板機

需要但未提供的材料
  • 37°C 培養(yǎng)箱

  • 多通道和單通道移液器和無菌移液器吸頭

  • 噴瓶或自動微孔板清洗機

  • 1.5 毫升試管

  • 蒸餾水

  • 吸水濾紙

  • 100 毫升和 1 升量筒

  • 酶標儀(波長:450 nm)

  • ELISA 搖床

試劑制備此過程僅供參考。產(chǎn)品手冊可能略有不同。產(chǎn)品應(yīng)按照隨附的產(chǎn)品手冊中的說明使用,并與產(chǎn)品一起交付。
  • 1) 標準品:用推薦體積的標準稀釋緩沖液配制標準品,制成標準溶液。然后按照協(xié)議中的說明,使用標準稀釋緩沖液對標準溶液進行系列稀釋。

  • 2) 洗滌緩沖液:按照方案中的說明,用蒸餾水稀釋濃縮的洗滌緩沖液。

  • 3) 檢測試劑制備:計算所需工作溶液的總體積。分別用稀釋劑 A 和稀釋劑 B 以 1:100 稀釋檢測試劑 A 和檢測試劑 B。

檢測程序此過程僅供參考。產(chǎn)品手冊可能略有不同。產(chǎn)品應(yīng)按照隨附的產(chǎn)品手冊中的說明使用,并與產(chǎn)品一起交付。
  • 1) 設(shè)置標準、測試樣品和對照孔。

  • 2) 將 100 µl 稀釋標準品分裝到標準孔中。

  • 3) 將 100 µl 標準稀釋緩沖液分裝到對照(零)孔中。

  • 4) 將 100 µl 稀釋樣品分裝到樣品孔中。在 37 °C 下孵育 1 小時。

  • 5) 將 100 µl 檢測試劑 A 分裝到每個孔中。在 37 °C 下孵育 1 小時。

  • 6) 洗滌 3 次。

  • 7) 將 100 µl 檢測試劑 B 分裝到每個孔中。在 37°C 下孵育 30 分鐘。

  • 8)洗滌5次。

  • 9) 將 90 µl TMB Substrate 分裝到每個孔中。在 37°C 下孵育 10-20 分鐘。

  • 10) 分裝 50 µl 終止液。

  • 11) 在 450 nm 處測量 OD。

協(xié)議此過程僅供參考。產(chǎn)品手冊可能略有不同。產(chǎn)品應(yīng)按照隨附的產(chǎn)品手冊中的說明使用,并與產(chǎn)品一起交付。
  • 使用前將套件組件和樣品平衡至室溫 (18 - 25 °C)。建議為每個測試繪制標準曲線。

  • 1. 在預(yù)涂板上分別設(shè)置標準孔、測試樣品孔和對照(零)孔,然后記錄它們的位置。建議至少測量每個標準和樣品一式兩份。

  • 2. 將 100 µL 每個標準品、質(zhì)控品和樣品加入適當?shù)目字小S蒙w子密封板并在 37°C 下孵育 1 小時。

  • 3. 取下蓋子并丟棄液體。

  • 4. 每孔加入 100 µl 檢測試劑 A 工作溶液。用蓋子密封板并在 37°C 下孵育 1 小時。

  • 5. 取下蓋子并丟棄溶液。用 1X 洗滌緩沖液洗滌板 3 次。

  • 6. 每孔加入 100 µL 檢測試劑 B 工作溶液,密封并在 37°C 下孵育 30 分鐘。

  • 7. 棄去溶液并用洗滌緩沖液洗滌板 5 次,如上一步所述。

  • 8. 將 90 µl TMB Substrate 分裝到每個孔中。用蓋子密封板并在 37°C 下孵育 10-20 分鐘。避免暴露在光線下。孵育時間僅供參考,最佳時間應(yīng)由最終用戶確定。不要超過 30 分鐘。

  • 9. 每孔加入 50 µL 終止液。立即在 450 nm 處讀取。

結(jié)果計算為了計算,平均每個參考標準和每個樣品的 OD450 重復(fù)讀數(shù),并減去平均對照(零)OD450 讀數(shù)。標準曲線可以繪制為每個參考標準溶液的相對 OD450 [Y] 與每個標準溶液的相應(yīng)濃度 (X)。樣品的 Asprosin 濃度可以從標準曲線中插值。
分析精度Intra-assay Precision (Precision within an assay):在一塊板上分別測試了 3 個低、中、高 Asprosin 水平的樣品 20 次。

測定間精密度(測定之間的精密度):在 3 個不同的板上測試了 3 個具有低、中和高水平 Asprosin 的樣品,每個板中重復(fù) 8 次。

CV (%) = (標準偏差/平均值) × 100

測定內(nèi):CV<10%

測定間:CV<12%
可用性5-12 個工作日內(nèi)發(fā)貨。
筆記本產(chǎn)品僅供研究使用。


范圍和靈敏度可能會發(fā)生變化。請聯(lián)系我們獲取最新的產(chǎn)品信息。為了獲得準確的結(jié)果,樣品濃度必須稀釋至試劑盒的中間范圍。如果您需要特定范圍,請?zhí)崆奥?lián)系我們或在您的訂單評論中寫下您的要求。


請注意,我們的 ELISA 和 CLIA 試劑盒針對天然樣品而非重組蛋白的檢測進行了優(yōu)化。我們無法保證檢測到重組蛋白,因為它們可能具有與天然蛋白不同的序列或三級結(jié)構(gòu)。
標準40 納克/毫升


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