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Bridge-It® L-蛋氨酸 (L-Met) 熒光檢測試劑盒說明書

 更新時間:2022-07-20 點擊量:1239

mediomics  Bridge-It® L-蛋氨酸 (L-Met) 熒光檢測試劑盒說明書

Bridge-It® L-蛋氨酸 (L-Met) 熒光檢測試劑盒,384 孔格式

貨號:1-1-1006

類別:384 孔板Bridge-It 檢測DNA 甲基化細胞內信號L-蛋氨酸

標簽:384 孔Bridge-ItL-MetL-蛋氨酸

Bridge-It® L-蛋氨酸 (L-Met) 熒光檢測試劑盒,384 孔格式

應用:

  • 直接測量樣品中的 L-Met 水平

  • 使用 Met 作為底物或 Met 作為產物的酶(即蛋氨酸氨基肽酶)的測定

特征:

  • 簡單: 將測試樣品或標準品與檢測溶液混合并孵育

  • 快速: 孵育 50 分鐘后讀取熒光信號

  • 敏感: 檢測 L-蛋氨酸的檢測下限為 10 µM

  • 靈活: 檢測適用于低通量和高通量篩選形式


L-蛋氨酸和 Bridge-It® 熒光檢測的背景信息

L-蛋氨酸 (L-Met)
L-蛋氨酸是一種必需氨基酸,必須從食物來源或膳食補充劑中獲取。它是其他含硫氨基酸、半胱氨酸、牛磺酸和谷胱甘肽的前體。蛋氨酸與三磷酸腺苷反應形成 S-腺苷蛋氨酸 (SAM),它是體內主要的甲基供體,有助于合成許多重要物質,包括腎上腺素和膽堿。L-蛋氨酸也是動物飼料的重要補充劑。目前,L-蛋氨酸使用高壓液相色譜 (HPLC) 方法進行定量。HPLC 耗時、昂貴,并且由于需要大量的有機溶劑,因此對環境不友好。

Bridge-It® L-蛋氨酸熒光 (L-Met) 檢測1,2

真核細胞含有大約 3,000 個序列特異性 DNA 結合蛋白。這些重要的蛋白質在有或沒有特定的小分子共調節因子(配體)的情況下起作用,控制基因組 DNA 活性的所有方面,包括基因表達、DNA 復制和 DNA 修復。Mediomics 正在應用其新型熒光檢測平臺開發體外檢測,用于快速、靈敏地量化 DNA 結合蛋白及其小分子配體的活性。

Mediomics Bridge-It® L-蛋氨酸熒光檢測方法基于成熟的熒光測量技術和新的檢測平臺設計的結合,利用 DNA 結合蛋白作為其各自小分子輔助調節劑(配體)的生物傳感器。DNA 序列特異性 MetJ 蛋氨酸抑制蛋白對其*的 DNA 結合位點的親和力在其配體 S-腺苷蛋氨酸 (SAM) 的存在下大大增加。對于該測定,MetJ 共有序列被分成兩個大致相等的 DNA “半位點",其中一個片段用熒光素標記,另一半片段用 Oyster® 645 熒光團3,4標記. 測試樣品中 SAM 的相對量將影響測定中 DNA-MetJ 蛋白復合物形成的量。當這種復合物形成時,它會將熒光標記的 DNA 半位點靠近并導致熒光信號發射發生可測量的變化(增加),這可以使用酶標儀輕松測量(波長設置:吸收 485 nm;發射 665 nm )。在存在 ATP 和 Mg2+ 的情況下,L-甲硫氨酸很容易被 S-腺苷甲硫氨酸合成酶轉化為 SAM。使用 L-蛋氨酸標準曲線確定測試樣品中的 L-蛋氨酸濃度。

Bridge-It® L-蛋氨酸熒光檢測方法具有非常理想的性能特征,包括高信噪比 (S/B)、良好的線性動態范圍和約 10 μM 的檢測限。總測定時間為 50 分鐘。

l-met-std-曲線

注:此標準曲線僅供參考。請生成您自己的標準曲線。

與 HPLC 程序相比,Bridge-It® L-蛋氨酸熒光檢測方法采用 384 和 96 孔微孔板形式。因此,它非常適合快速、同時測量大量測試樣品中的 L-蛋氨酸水平。此外,這種方法很容易適應目前用于藥物發現研究的高通量篩選平臺。

定價:  100 孔套件是一次性試用購買。





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