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matrixome層粘連蛋白511E8片段簡介

 更新時間:2022-07-20 點擊量:1527


matrixome層粘連蛋白511E8片段簡介

Laminin-511 是基底膜的主要成分,可作為多能干細胞(ES/iPS 細胞)的支架。
作為基底膜的一部分,層粘連蛋白 511 (800 kDa) 與細胞表面的整合素結合。
Laminin-511 是一種非常大的蛋白質 (800 kDa),由三條鏈(α-、β-和 γ- 鏈)組成,并形成超分子聚集體。很難作為重組蛋白生產。
當我們將 Laminin-511 片段化并在細胞表面尋找與整合素結合的最小成分時,我們確定了稱為 Laminin-511 E8 片段 (150 kDa) 的成分。我們決定將該成分作為重組蛋白生產。

與“Laminin-511 (Intact)"相比,人類 iPS 細胞對 Laminin-511E8 片段的粘附更強。

與“Laminin-511 (Intact)"相比,人類 iPS 細胞對 Laminin-511 E8 片段的粘附更強。
比較了層粘連蛋白 511 E8 片段和其他底物的細胞附著。
吸光度 (OD570) 表示相對于對 Matrigel 的最大影響值進行歸一化的附著細胞的相對數量,該值被任意設置為 1。
該結果證實層粘連蛋白-511 E8 片段強烈地粘附于細胞。

單個人類 ES 細胞迅速附著在 Laminin-511E8 片段上并增殖。


分散的人單個 ES 細胞迅速粘附在 Laminin-511 E8 片段上并立即增殖。
我們在層粘連蛋白 511 E8 片段和其他細胞培養基質上傳代人 ES 細胞。
傳代時單個人 ES 細胞集落證實 Laminin-511 E8 片段迅速粘附在細胞上并增殖。

在 ES/iPS 細胞培養中使用 Laminin-511E8 片段的更多優勢

使用傳統的培養方法,如果 ES/iPS 細胞分散成單個細胞,細胞就會死亡。
因此,在傳代時,一定程度上需要維持一個細胞集落。

使用 Laminin-511 E8 片段作為細胞培養基質,甚至可以維持和培養單個 ES/iPS。
-> 減少學習細胞培養方法所需的時間。
-> 細胞培養的延伸效率顯著提高。

使用 Laminin-511E8 片段生長 ES/iPS 細胞


*5天
*菌落傳代方法

傳統的培養方法(菌落傳代)傳代時的延伸效率為1:4,而使用Laminin-511 E8片段作為細胞培養基質時,延伸率為1:100。

使用 Laminin-511E8 片段批量生產 ES/iPS 細胞培養物

我們比較了傳統方法(菌落法)培養30天的ES/iPS細胞數量和使用Laminin-511 E8片段作為細胞培養基質培養的ES/iPS細胞數量。圖表的橫軸表示培養天數,縱軸表示細胞數。
結果證實,與傳統方法(菌落法)相比,使用Laminin-511 E8片段的細胞數增加了200或更多。


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