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?cellabs KM8說(shuō)明書(shū)

 更新時(shí)間:2022-08-02 點(diǎn)擊量:1017


cellabs KM8說(shuō)明書(shū)

QUANTIMAL™ CELISA

產(chǎn)品代碼:KM8/KM8BP

超敏感PfHRP2瘧疾

試驗(yàn)的預(yù)期用途和原理

QUANTIMALTM CELISAP PUltra-sensitive PfHRP2瘧疾是一種基于原始瘧疾Ag CELISA分析的定量ELISA。使用相同的抗-P。作為瘧疾Ag CELISA的惡性瘧原蟲(chóng)(P.f)單克隆抗體,該試驗(yàn)的開(kāi)發(fā)旨在提高HRP-2定量至皮克級(jí)的靈敏度,檢測(cè)下限約為0.02納克/毫升。可以使用全血樣本、培養(yǎng)上清液、血清或血漿樣本以及其他含有HRP-2的制劑。在傳統(tǒng)診斷不明確的情況下,該試驗(yàn)也可作為惡性瘧疾的確認(rèn)試驗(yàn),用于篩查輸血產(chǎn)品,或確認(rèn)與旅行有關(guān)的感染病例。它不打算取代傳統(tǒng)的血片診斷。

夾心ELISA原理使用預(yù)涂有抗-P的微孔。f單克隆捕獲抗體和二級(jí)檢測(cè)抗-P。f與辣根過(guò)氧化物酶結(jié)合的單克隆抗體。樣品中的HRP-2在孵育步驟中與包被在微孔上的抗體結(jié)合,洗滌步驟去除未結(jié)合的成分。在第二個(gè)培養(yǎng)步驟中添加共軛物以使抗體-HRP-2結(jié)合,在洗滌步驟中去除未結(jié)合的成分。抗體-HRP-2復(fù)合物是為了可視化而開(kāi)發(fā)的,通過(guò)添加一種基質(zhì),將微孔變成藍(lán)色。通過(guò)添加使藍(lán)色絡(luò)合物變黃的停止溶液來(lái)停止反應(yīng)。顏色強(qiáng)度與樣品中檢測(cè)到的HRP-2量成正比。


將所有組件存儲(chǔ)在2-8P OPC。每個(gè)套件組件和盒子上都清楚地標(biāo)明了有效期。一旦打開(kāi),到期日期不變。

需要但未提供的材料

瘧疾陽(yáng)性血樣、蒸餾水、微量移液管、用于溶液的清潔玻璃器皿或塑料容器、濕室、ELISA墊圈、分光光度計(jì),用于讀取450nm單波長(zhǎng)或450nm和620nm雙波長(zhǎng)下的吸光度。

注意事項(xiàng)

僅供體外診斷使用。試劑不得在標(biāo)簽上顯示的有效期后使用。如果保護(hù)性包裝損壞,請(qǐng)聯(lián)系當(dāng)?shù)亟?jīng)銷商并要求更換。不要混合不同試劑盒中的試劑。添加到某些成分中的硫柳汞防腐劑是一種有毒物質(zhì)。處理這些部件時(shí)要小心。停止溶液具有腐蝕性。避免接觸皮膚、眼睛和粘膜。小心地分配所有試劑,以避免井的交叉污染。

避免基板暴露在光線下。將所有臨床和對(duì)照材料視為具有潛在感染性,并根據(jù)當(dāng)?shù)夭僮鞣ㄒ?guī)進(jìn)行處置。有關(guān)更多信息,請(qǐng)參閱材料安全數(shù)據(jù)表。

使用說(shuō)明

洗滌緩沖液的制備

如果存在晶體,加熱濃縮液使其溶解。對(duì)于每個(gè)微孔板,將50mL PBS吐溫濃縮物QUPT添加到950mL蒸餾水中。給洗瓶緩沖液貼上標(biāo)簽。儲(chǔ)存在2-8PoPC。

樣品的制備

使用抗凝劑通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)靜脈穿刺程序采集患者血液。使用一個(gè)凍融循環(huán)溶解血液,使用溶解的血液作為試樣

(示例)。可使用RPMI作為稀釋劑,通過(guò)滴定法重新測(cè)試檢測(cè)到超過(guò)檢測(cè)限(>OD 3.0)的高寄生蟲(chóng)血癥樣品。血清或血漿可作為全血的替代品,盡管HRP-2的濃度明顯低于全血。如果分析延遲,血液應(yīng)儲(chǔ)存在-10Po PC以下。

陽(yáng)性和陰性對(duì)照

標(biāo)準(zhǔn)化陽(yáng)性對(duì)照用于對(duì)照規(guī)范驗(yàn)證試劑盒性能,并構(gòu)建用于量化的標(biāo)準(zhǔn)曲線。陽(yáng)性對(duì)照在2-8時(shí)不穩(wěn)定

收到后20天以上的oC。重要的是將凍存于-20℃的陽(yáng)性對(duì)照品短期儲(chǔ)存(從到達(dá)之日起至3個(gè)月)或在-80℃下長(zhǎng)期儲(chǔ)存(至12個(gè)月)。建議在儲(chǔ)存前以較小的體積等分,以避免凍融循環(huán)。陰性對(duì)照為RPMI。

RPMI可用于在檢測(cè)前稀釋陽(yáng)性對(duì)照。

重要提示:陽(yáng)性對(duì)照已標(biāo)準(zhǔn)化,以提供相當(dāng)于HRP-2量的ELISA值(OD),對(duì)測(cè)定程序的修改可能會(huì)改變陽(yáng)性對(duì)照標(biāo)準(zhǔn)曲線的預(yù)期OD值。


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