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?cellabs KM8說明書

 更新時間:2022-08-02 點擊量:1018


cellabs KM8說明書

QUANTIMAL™ CELISA

產品代碼:KM8/KM8BP

超敏感PfHRP2瘧疾

試驗的預期用途和原理

QUANTIMALTM CELISAP PUltra-sensitive PfHRP2瘧疾是一種基于原始瘧疾Ag CELISA分析的定量ELISA。使用相同的抗-P。作為瘧疾Ag CELISA的惡性瘧原蟲(P.f)單克隆抗體,該試驗的開發旨在提高HRP-2定量至皮克級的靈敏度,檢測下限約為0.02納克/毫升。可以使用全血樣本、培養上清液、血清或血漿樣本以及其他含有HRP-2的制劑。在傳統診斷不明確的情況下,該試驗也可作為惡性瘧疾的確認試驗,用于篩查輸血產品,或確認與旅行有關的感染病例。它不打算取代傳統的血片診斷。

夾心ELISA原理使用預涂有抗-P的微孔。f單克隆捕獲抗體和二級檢測抗-P。f與辣根過氧化物酶結合的單克隆抗體。樣品中的HRP-2在孵育步驟中與包被在微孔上的抗體結合,洗滌步驟去除未結合的成分。在第二個培養步驟中添加共軛物以使抗體-HRP-2結合,在洗滌步驟中去除未結合的成分。抗體-HRP-2復合物是為了可視化而開發的,通過添加一種基質,將微孔變成藍色。通過添加使藍色絡合物變黃的停止溶液來停止反應。顏色強度與樣品中檢測到的HRP-2量成正比。


將所有組件存儲在2-8P OPC。每個套件組件和盒子上都清楚地標明了有效期。一旦打開,到期日期不變。

需要但未提供的材料

瘧疾陽性血樣、蒸餾水、微量移液管、用于溶液的清潔玻璃器皿或塑料容器、濕室、ELISA墊圈、分光光度計,用于讀取450nm單波長或450nm和620nm雙波長下的吸光度。

注意事項

僅供體外診斷使用。試劑不得在標簽上顯示的有效期后使用。如果保護性包裝損壞,請聯系當地經銷商并要求更換。不要混合不同試劑盒中的試劑。添加到某些成分中的硫柳汞防腐劑是一種有毒物質。處理這些部件時要小心。停止溶液具有腐蝕性。避免接觸皮膚、眼睛和粘膜。小心地分配所有試劑,以避免井的交叉污染。

避免基板暴露在光線下。將所有臨床和對照材料視為具有潛在感染性,并根據當地操作法規進行處置。有關更多信息,請參閱材料安全數據表。

使用說明

洗滌緩沖液的制備

如果存在晶體,加熱濃縮液使其溶解。對于每個微孔板,將50mL PBS吐溫濃縮物QUPT添加到950mL蒸餾水中。給洗瓶緩沖液貼上標簽。儲存在2-8PoPC。

樣品的制備

使用抗凝劑通過標準靜脈穿刺程序采集患者血液。使用一個凍融循環溶解血液,使用溶解的血液作為試樣

(示例)。可使用RPMI作為稀釋劑,通過滴定法重新測試檢測到超過檢測限(>OD 3.0)的高寄生蟲血癥樣品。血清或血漿可作為全血的替代品,盡管HRP-2的濃度明顯低于全血。如果分析延遲,血液應儲存在-10Po PC以下。

陽性和陰性對照

標準化陽性對照用于對照規范驗證試劑盒性能,并構建用于量化的標準曲線。陽性對照在2-8時不穩定

收到后20天以上的oC。重要的是將凍存于-20℃的陽性對照品短期儲存(從到達之日起至3個月)或在-80℃下長期儲存(至12個月)。建議在儲存前以較小的體積等分,以避免凍融循環。陰性對照為RPMI。

RPMI可用于在檢測前稀釋陽性對照。

重要提示:陽性對照已標準化,以提供相當于HRP-2量的ELISA值(OD),對測定程序的修改可能會改變陽性對照標準曲線的預期OD值。


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