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HE染液說明書

 更新時間:2023-03-23 點擊量:890

HE染液說明書

 

上海起發生物科技有限公司(Shanghai BioHub Biotechnology Co., Ltd.)屬于上海起發實驗試劑有限公司(2009年成立)旗下的子公司,成立的初衷是建立上海起發生物自有品牌,打造優質的生物試劑民族自有品牌。降低成本的同時,把好生物產業鏈中的國產生物試劑品質關。未來讓每一個和我們一樣擁有民族情懷的企業,共同創世界優秀的中國生物制造企業,圓夢中國。

 

產品描述

HE染色,即蘇木素(Hematoxylin)和伊紅(Eosin)聯合染色,是組織學、胚胎學、病理學教學與科研中最基本、使用廣泛的技術方法。蘇木素染液為堿性,主要使細胞核內的染色質、胞質內的核酸著藍色至藍紫色;伊紅為酸性染料,主要使細胞質和細胞外基質中的成分著紅色。HE染色可用于觀察比較正常組織與病變組織的形態結構,可初步確定或鑒別病變組織、細胞中出現的異常物質。經本產品HE染液染色的組織或細胞,細胞核呈藍色至藍紫色,細胞漿呈紅色,胞漿與胞核對比鮮明。

產品組分

組成

Component

78GD10081-100mL

78GD10081-500ML

蘇木素染液

100 mL

500 mL

伊紅染液(醇溶)

100 mL

500 mL

 

使用方法

使用方法

1. 樣本前處理

(1) 對于石蠟切片:切片依次經二甲苯脫蠟10 min,更換新鮮的二甲苯脫蠟10 min,無水乙醇 5min,新鮮無水乙醇5 min,90%乙醇5 min,75%乙醇5 min,自來水洗。

(2) 對于冰凍切片:-20℃保存的冰凍切片需靜置5-10 min恢復至室溫。如需固定,則經所需固定液室溫后自來水洗。

2. HE染色

(1) 蘇木素染色:上述處理好的切片,進入蘇木素染液染色3-5 min,自來水洗;

(2) 分化:切片經蘇木素分化液2-5 s,自來水流水充分沖洗;

(3) 返藍:蘇木素返藍液返藍2-5 s,自來水流水充分沖洗;

(4) 伊紅染色:切片依次經85%、95%梯度乙醇脫水,各5 min。然后進入伊紅染液(醇溶)中染色5 min,經兩次無水乙醇脫水各5 min;

(5) 透明:切片再經新鮮無水乙醇脫水5 min,二甲苯透明5 min,更換新鮮的二甲苯再透明5 min。

(6) 封片:滴加中性樹膠進行封片。

注意事項

1. 染色后用特定溶液將組織中過多結合的染液脫去,這個過程稱為分化作用,所用溶液稱為分化液。在HE染色種常用低濃度鹽酸作為分化液,因為酸能破壞蘇木素的醌型結構結構,使色素與組織分離而褪色。組織在經蘇木素染色后,必須經過分化去除組織中過多結合及非特異性吸附的染料,才能進行伊紅染色,確保細胞核與胞漿顯色分明。可使用78NB10002蘇木素分化液。分化過程中,根據組織切片厚度、組織類型等結合鏡下觀察適當調整分化時間。

 

2. HE染色中蘇木素染色后的返藍很重要。蘇木素在酸性條件下為離子狀態,呈紅色;在堿性條件下呈藍色。組織切片經酸性分化液分化后呈紅色或粉紅色,需立即水洗終止分化,再用弱堿性溶液使蘇木素,這個過程就是返藍作用。如果沒有專用的返藍液,用溫水浸洗也能使細胞核返藍,只是所需時間略長。推薦78NB10003蘇木素返藍液。

3. 蘇木素及伊紅染色程度可以根據染色需要進行調整染色時間。

4. 蘇木素染液可重復使用多次,每次用完后需密封保存,防止有效成分揮發。當組織或細胞著色明顯偏淺或顏色異常時請更換新的染液。

5. 用于染色后脫水的無水乙醇純度需大于99.9%。如果乙醇含水,伊紅會褪色導致染色不均勻。

6. 伊紅染液(醇溶)可反復使用數次,當組織著色明顯偏淺時建議更換新的染液。

7. 操作時請穿實驗服,佩戴一次性手套。

 



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