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PCR法支原體檢測試劑盒說明書

 更新時間:2023-04-11 點擊量:708

PCR法支原體檢測試劑盒說明書

上海起發生物科技有限公司(Shanghai BioHub Biotechnology Co., Ltd.)屬于上海起發實驗試劑有限公司(2009年成立)旗下的子公司,成立的初衷是建立上海起發生物自有品牌,打造優質的生物試劑民族自有品牌。降低成本的同時,把好生物產業鏈中的國產生物試劑品質關。未來讓每一個和我們一樣擁有民族情懷的企業,共同創世界優秀的中國生物制造企業,圓夢中國。

產品詳情

貨號

規格

價格

78EA10015-50T

50T

240.00

 

 

產品描述

支原體污染會對細胞各個方面都造成不良影響,已經成為細胞培養中高度重視的問題,因此,定期進行支原體污染檢測是十分必要的。本支原體檢測試劑盒是采用PCR方法,特異性的檢測各種培養細胞生物材料(如細胞培養物、實驗動物分泌物、動物血清等)中支原體的污染。試劑盒使用的混合引物是針對支原體16s rRNA序列的保守區域設計的特異性引物,可直接使用細胞培養液作為PCR模板,特異性擴增支原體DNA,搭配配套的Mycoplasma PCR Mix(2×)一小時內即可完成,本試劑盒檢測靈敏度高,可檢測低至20個拷貝的支原體。

產品組分

組成

78EA10015-50T

Mycoplasma PCR Mix(2×)

1 mL

Mycoplasma Primer Mix

100 μL

Positive Control

50 μL

Mycoplasma Free Water

1 mL

使用方法

使用方法

1. 樣品準備:取適量待檢細胞培養上清于潔凈的PCR管中,利用PCR儀95℃熱處理5 min后作為模板。血清樣本可利用無支原體去離子水水稀釋后,取適量樣本于潔凈的PCR管中,利用PCR儀95℃熱處理5 min后作為模板;

2. PCR體系配制:每次實驗需設置陰性對照(將1 μL待檢樣品換成等量的無支原體去離子水)與陽性對照(在1 μL待檢樣品中加入0.5 μL Positive Control后一起作為Template),實驗時戴一次性口罩與手套,謹慎操作,防止操作不當引入外源支原體污染;

3. PCR程序設置

步驟

溫度

時間

周期

Initial Denaturation

98℃

2 min

1

Denaturation

98℃

20 s

30

Annealing

56℃

25 s

Extension

72℃

10 s

Final extension

72℃

5 min

1

Hold

4-16℃

Forever


 

4. 凝膠電泳:取10 μL PCR產物,使用1%瓊脂糖凝膠進行電泳檢測;

 

5. 結果分析:每次實驗通過與陰性對照、陽性對照檢測結果比較確認樣品支原體污染情況,陽性條帶大小500 bp左右。如陰性對照檢測結果中有條帶很有可能是PCR體系中出現污染,建議重新實驗確認結果。如有必要,也可對PCR產物進行常規測序,以確定具體的支原體種屬。

注意事項

1. 本試劑盒可以檢測M.orale,M.arginini,M.bovis,M.fermentans,M.gallisepticum,M.hominis,M.pirum,Ureaplasma spp,M.hyorhinis,M.pneumoniae,A.laidlawii等至少11種以上支原體污染。

2. 所有試劑在使用前于冰上充分解凍、混勻,使用完畢后于-20℃保存。

3. 每次實驗必須設置陰性對照、陽性對照,實驗組建議設置樣品模板梯度。

4. 操作時必須佩戴口罩,嚴格按照PCR操作標準,防止引入外源污染影響實驗結果。

5. 為了確保細胞實驗的可靠性及穩定性,建議定期進行支原體污染檢測。

6. 為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。

運輸及保存方法

冰袋(wet ice)運輸;-20℃保存,有效期12個月。

 

產品用途

    《PCR法支原體檢測試劑盒》(PCR Mycoplasma Detection Kit)可用于檢測一切可能含支原體的樣品,比如:(1)體外細胞培養的上清;(2)血清;(3)各種體液,如唾液、尿液、鼻腔分泌物等;(4)別的液體樣品。本產品僅供研究使用。


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